UJI BATAS MIKROBA

I.          Tujuan

Mahasiswa dapat melakukan uji batas mikroba suatu produk

II.        Dasar Teori

Uji Batas Mikroba dilakukan untuk memperkirakan jumlah mikroba aerob viabel di dalam semua jenis perbekalan farmasi, mulai dari bahan baku hingga sediaan jadi, untuk mengyatakan perbekalan farmasi tersebut bebas dari spesies mikroba tertentu. Otomatisasi dapat digunakan sebagai pengganti uji yang akan disajikan, dengan ketentuan bahwa cara tersebut sudah divalidasi sedemikian rupa hingga menunjukkan hasil yang sama atau lebih baik. Selama menyiapkan dan melaksanakan pengujian, specimen harus ditangani secara aseptik. Jika tidak dinyatakan lain, jika disebut ”inkubasi”, maka yang dimaksud adalah menempatkan wadah di dalam ruangan terkendali secara termostatik pada suhu 30° dan 35° selama 24 jam sampai 48 jam. Istilah “tumbuh” ditunjukan untuk pengertian adanya dan kemungkinan adanya perkembangan mikrona viabel.

Uji Pendahuluan

Validasi hasil yang akan disajikan disini dalam banyak hal berdasarkan pada ketentuan yang menunjukkan bahwa spesimen uji tidak menghambat pertumbuhan mikroba yang terdapat dalam spesimen itu sendiri. Jadi sebagai uji pendahuluan dilakukan inokulasi secara terpisah enceran spesimen uji dengan biakan viabel yang terdiri dari Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, dan Salmonella. Pengujian dilakukan dengan menambahkan 1 ml dari tidak kurang enceran  biakan mikroba berumur 24 jam kepada enceran pertama spesimen uji (dalam dapar fosfat pH 7,2, Media Fluid Soybean-Casein Digest atau Media Fluid Lactose Medium dan uji sesuai prosedur. Jika tidak terdapat pertumbuhan mikroba di media bersangkutan, maka pengujian tersebut dinyatakan tidak berlaku dan diperlukan modifikasi prosedur dengan (1) meningkatkan volume pengencer dengan tetap mempertahankan bahan uji, atau (2) menambahkan zat inaktivator dengan jumlah secukupnya ke dalam pengencer, atau (3) suatu kombinasi modifikasi (1) dan (2) sedemikian rupa hingga terdapat pertumbuhan inokulum.

Bahan berikut ini adalah contoh dan konsentrasi zat yang ditambahkan ke dalam media untuk menetralkan zat penghambat yang terdapat di dalam contoh, yaitu lesitin kedele 0,5% dan polisorbat 204,0%. Sebagai alternatif, ulangi pengujian menggunakan Media Fluid Soybean-Casein Digest-Soy Lecithin-Polysorbate 20 untuk menunjukan netralisasi pengawet atau bahan antimikroba lainnya di dalam contoh. Jika zat penghambat terdapat di dalam sediaan dan dapat larut, dapat digunakan prosedur yang divalidasi dan sesuai seperti Prosedur uji menggunakan penyaringan membrane yang tertera pada Uji Sterilitas.

Jika penambahan inaktivator dan peningkatan volume seperti disebut di atas masih tidak dapat menunbuhkan mikroba viabel dan jika contoh tidak cocok tidak cocok diuji dengan cara penyaringan membrane, maka dapat disimpulkan bahwa kegagalan isolasi mikroba disebabkan oleh daya bakterisida dari sediaan. Informasi ini berguna untuk menunjukkan bahwa contoh tidak dapat dikontaminasi oleh jenis mikroba yang digunakan. Pemantauan perlu dilanjutkan untuk menetapkan besarnya daya hambat dan daya bakterisida dari bahan tersebut.

Larutan Dapar dan Media

Media biakan dapat dibuat seperti dibuat di bawah ini, atau media biakan dehidrat dapat digunakan jika sudah direkonstitusi sesuai petunjuk produsen atau distributor memiliki bahan yang sebanding dan/atau menghasilkan media yang sama dengan media yang menggunakan formula seperti disebut di bawah ini.

Peda pembuatan media menggunakan formula yang disebut di bawah ini, larutkan bahan padat yang dapat larut dalam air, jika perlu panaskan hingga larup sempurna, dan tambahkan larutan asam klorida atau natrium hidroksida secukupnya hingga diperoleh media dengan pH yang diinginkan, jika sudah siap digunakan. Tetapkan pH pada suhu 25° ± 2°.

Jika pada formula disebut agar, gunakan agar dengan kadar air tidak lebih dari 15% dan jika disebut air, gunakan Air Murni.

Larutan Dapar Posfat pH 7,2

Larutan 34g kalium posfat monobasa P dalam lebih kurang 500 ml air dalam labu terukur-1000 ml; tambahkan lebih kurang 175 ml natrium hidroksida 1 N hingga pH 7,2 ± 0,1. Tambahkan air sampai tanda, dan campur. Masukkan dalam beberapa wadah dan sterilkan. Simpan dalam lemari pendingin.

Sebelum digunakan, encerkan 1 bagian larutan dengan 800 bagian air, dan sterilkan.

Media

Jika tidak dinyatakan lain, media harus disterilkan dengan pemanasan dalam otoklaf (seperti yang tertera pada Sterilitas uap air dalam Sterilitas dan Jaminan Strerilitas Bahan Konfendia. Waktu paparan tergantung pada volume yang disterilkan.

Media FCDSLP (Fluid Casein Digest-Soy Lecithin-Polysorbate 20 Medium)

Digesti pankreatik kasein P  20      g

Lesitin kedele                     5     g

Polisorbat 20 P                   40   ml

Air                                          960           ml

Larutkan Digesti pankreatik kasein P dan Lesitin kedele di dalam tangas air pada suhu 48° sampai 50° selama lebih kurang 30 menit hingga larut. Tambahkan 40 ml Polisorbat 20 P, campur dan masukkan dalam wadah sesuai yang dikehendaki.

Media PCA (Plate Count Agar)

Yeast                                          2,5       g

Pancreatic digest of Casein            5          g

Glucose                                     1          g

Agar                                           15-20  g

Air Suling                                                1          L

Sebelum digunakan, sesaat sebelum dituang ke dalam cawan, terhadap media yang telah meleleh dan didinginkan hingga 45° pH diatur hingga 3,5 ± 0,1 menggunakan larutan asam ladrat P steril (1 dalam 10). Media dengan pH tidak boleh dipanaskan lagi

Prosedur

Spesimen yang akan diuji disiapkan sedemikian rupa sesuai dengan sifat fisiknya dan tidak mengubah jumlah dan jenis mikroba yang semula ada hingga diperoleh larutan atau suspensi dari semua atau sebagian spesimen dalam bentuk yang sesuai dengan prosedur uji yang akan dilaksankan.

Untuk bahan padat yang tidak seluruhnya melarut, perkecil ukuran bahan hingga merupakan serbuk cukup halus, suspensikan ke dalam pembawa tertentu, dan lakukan pengujian seperti tertera pada Angka Mikroba Aerob Total, Uji Staphylococcuc aureus dan Pseudomonas aeruginosa, Uji Salmonella sp dan Escherichia coli.

Untuk spesimen cair yang terdiri atas larutan, suspense dalam air atau suatu larutan pembawa hidroalkoholik yang mengandung etanol kurang dari 30%, dan untuk bahan padat yang mudah larut dan praktis larus sempurna di dalam 90 ml dapar posfat pH 7,2 atau media tertentu, lakukan pengujian seperti tertera pada Angka Mikroba Aerob Total, Uji Staphylococcuc aureus dan Pseudomonas aeruginosa, Uji Salmonella sp dan Escherichia coli.

Untuk cairan tidak campur air/salep, krim dan malam dibuat suatu suspensi dengan menggunakan emulgator steril yang sesuai dalam jumlah yang minimal (misalnya salah satu polisorbat), gunakan blender mekanik dan jika perlu hangatkan hingga suhu tidak lebih dari 45° san lanjutkan pengujian seperti tertera pada Angka Mikroba Aerob Total, Uji Staphylococcuc aureus dan Pseudomonas aeruginosa, Uji Salmonella sp dan Escherichia coli.

Untuk spesimen cair dalam bentuk aerosol, dinginkan wadah dalam campuran alcohol dan es kering selama lebih kurang 1 jam, buka tutup wadah dan biarkan hingga mencapai suhu kamar, dan biarkan propelan terbebas, atau jika memungkinkan hangatkan wadah untuk mendorong propelan keluar. Pindahkan sejumlah tertentu bahan uji yang diperlukan untuk pengujian seperti yang tertera pada salah satu dari dua paragraph yang telah diutarakan sebelumnya. Jika hasil pengujian menggunakan residu. Jika ahasil pengujian menggunakan tidak dapat disimpulkan atau meragukan, ulangi pengujian dengan menggunakan 20 wadah atau lebih.

Angka Mikroba Aerob Total

Untuk spesimen yang cukup melarut atau transulen hingga dapat diuji dengan metode lempeng, gunakan cara tersebut; jika tidak gunakan Metode Tabung Ganda. Dengan menggunakan salah satu dari kedua cara tersebut, mula-mula larutkan atau suspensikan 10.0 g spesimen berbentuk padat, atau 10 ml spesimen berbentuk cair yang diukur saksama, di dalam dapar posfat pH 7,2, Media FSCD atau Media FCDSLP hingga diperoleh 100 ml. Untuk spesimen kentalyang pada pengenceran awal (1:10) tidak dapat dipipet, encerkan spesimen hingga diperoleh suspensi (1:50) atau (1:100), dan seterusnya hingga dapat dipipet. Lakukan pengujian untuk menetapkan tidak terdapatnya zat penghambat (zat antimikroba) seperti yang tertera pada Uji Pendahuluan, sebelum melakukan penetapan Angka Mikroba Aerob Total. Masukkan spesimen ke dalam media tidak lebih dari 1 jam setelah membuat enceran yang sesuai untuk inokulasi.

Terdapat dua metode yang dapat dilakukan untuk Uji Batas Mikroba, yaitu:

1.   Metode Lempeng

Metode ini dilakukan dengan cara inokulasi sediaan uji (specimen) dengan berbagai pengenceran pada media agar tertentu. Setelah inkubasi 48 samapai dengan 72 jam, pertumbuhan mikroba pada berbagai pengenceran diamati dan dihitung jumlah koloni yang tumbuh.

Jika perlu encerkan cairan lebih lanjut sedemikian rupa hingga 1 ml diharapkan dapat menghasilkan 30 koloni sampai 300 koloni. Pipet 1 ml enceran akhir masing-masing ke dalam 2 cawan petri steril. Segera tambahkan ke dalam cawan 15 ml sampai 20 ml Media SCDA yang sebelumnya telah dicairkan dan didinginkan hingga lebih kurang 45°. Tutup cawan petri, campur contoh dan agar dengan cara memiringkan atau memutarnya, dan biarkan isi cawan memadat pada suhu kamar. Balikkan cawan dan inkubasi selama 48 jam hingga 72 jam. Setelah inkubasi, amati pertumbuhan di dalam lempeng, hitung jumlah koloni, dan dari kedua lempeng nyatakan rata-rata jumlah mikroba tiap g atau ml spesimen. Jika tidak ditemukan koloni mikroba di dalam cawan dengan enceran awal (1:10), nyatakan hasil pengujian sebagai: “kurang dari 10 mikroba per g atau ml spesimen”.

2.   Metode Tabung Ganda

Metode ini dilakukan dengan menggunakan beberapa tabung yang berisi media dan diinokulasikan dengan sediaan uji (spesimen) konsentrasi tertentu. Setelah diinkubasikan, amati adanya pertumbuhan mikroba pada setiap tabung. Jumlah mikroba yang tumbuh tiap g atau ml spesimen dihitung dari nilai duga terdekat/MPN (Most Probable Number) berdasarkan table MPN.

Ke dalam setiap tabung dari 14 tabung berukuran sama tambahkan mesing-masing 9,0 ml Media FSCD steril. Pisahkan 12 tabung dan bagi dalam 4 kelompok masing-masing terdiri dari 3 tabung. Satu kelompok sebagai control dan 3 kelompok lain sebagai: kelompok 1 (“100”), kelompok 2 (“10”), kelompok 3 (“1”), dan 2 tabung lainnya masing-masing dinyatakan sebagai tabung A dan tabung B. Ke dalam masing-masing tabung kelompok 1 (“100”) dan tabung A dimasukkan 1ml larutan atau suspensi spesimen dan campur. Dari tabung A dipipet 1 ml ke tabung B, dan campur. Tabung A dan tabung B masing-masing akan berisi 100 mg (100 l) dan 10 mg (10 l) spesimen. Ke dalam masing-masing tabung kelompok 2 (“10”) tambahkan 1 ml dari tabung A, ke dalam masing-masing tabung kelompok (“1”)  tambahkan 1 ml dari tabung B. Buang sisa isi dari tabung dan inkubasikan. Setelah diinkubasi, amati adanya pertumbuhan di dalam tabung, ketuga tabung control akan tetap jernih, dan berdasarkan ada tidaknya pertumbuhan di kelompok 1, kelompok 2 dan kelompok 3, dan menggunakan acuan pada table, nyatakan Nilai Duga Terdekat (MPN) mikroba tiap g atau ml spesimen.

Sediaan Uji yang Digunakan

Merk                       :  Frestea Lemon

Netto                     :  500 ml

Komposisi             :  Air, Gula, Sari Buah Lemon, Konsentrat Teh, Pengatur Keasaman Asam Sitrat, Perisa Lemon & Cooling, Antioksidan Asam Askorbat.

Expired date       :  21 Januari 2011

Kode Produksi      :  BD3C 03:42

Diproduksi Oleh  :  PT. Coca-Cola Bottling Indonesia

Bekasi 17520 – Indonesia

Interpretasi hasil

Bila dari seluruh [etri tidak satu pun ynag menunjukkan jumlah antara 30 sampai dengan 300 koloni, maka dicatat angka sebenarnya dari tingkat pengenceran terendah dan dihitung sebagai angka lempeng total perkiraan.

III.      Alat dan Bahan

1.   Alat

-       Cawan Petri

-       Tabung Reaksi

-       Labu Elenmeyer 250 ml

-       Pipet volum 10 ml

-       Pipet volum 1 ml

-       Labu ukur 100 ml

-       Coloni Counter

2.   Bahan

-       Media PCA

-       Garam Fisiologi

-       Aquadest steril

-       Sediaan Uji

IV.    Cara Kerja

a.  Siapkan 6 tabung reaksi steril, susun pada rak tabung. Masing-masing tabung secara berurutan diberi tanda  sebagai kode pengenceran dan tanggal pemeriksaan

b.  Siapkan pula 7 petri dish steril. Pada 6 petri dish diberi tanda di bagian belakangnya sesuai dengan kode pengenceran da tanggal pemeriksaan seperti pada butir a. Satu petri dish lainnya diberi tanda “kontrol”

c.   Pada Tabung kedua sampai dengan ke enam, diisi dengan 9 ml air garam phisiologis atau aquadest atau larutan garam buffer phosphate, untuk pemeriksaan Bacillus aureus harus menggunakan larutan garam buffer phosphate

d.  Kocok bahan spesimen 10 ml dengan 90 ml air garam fisiologis, atau aquadest steril, atau garam buffer phosphate pH 7,2 dalam labu elenmeyer. Ambil 10 ml masukkan pada tabung kesatu

e.   Pindahkan 1 ml bahan dari tabung kesatu ke dalam tabung kedua dengan pipet, cairan dibuat sampai homogen

f.     Pindahkan 1 ml bahan dari tabung kedua ke dalam tabung ketiga dengan pipet, cairan dibuat sampai homogen

g.  Demikian seterusnya hingga tabung keenam

h.   Dari masing-masing tabung, dimulai dari tabung keenam dengan menggunakan pipet steril, diambil 1 ml ke dalam masing-masing petri dish steril, sesuai dengan kode pengenceran yang sama

i.      Kemudian ke dalam masing-masing petri dish dituang media yang telah dipanaskan dalam tangas air ± 45° C sebanyak 15 – 20 ml. Masing-masing petri digoyang perlahan-lahanhingga tercampur merata dan biarkan hingga dingin membeku

j.      Masukkan ke dalam inkubator 37° C selama 2 x 24 jam dalam keadaan terbalik

k.    Kontrol dibuat dari cairan air garam phiologis atau aquadest atau larutan garam buffer phosphate, dimasukkan ke dalam petri dish “kontrol” dan dituangi media cair tersebut di atas sebanyak 15 – 20 ml

l.      Pembacaan dilakukan setelah 2 x 24 jam dengan cara menghitung jumlah koloni yang tumbuh pada setiap petri dish.

V.       Hasil Pengamatan

Tabel Hasil Pengamatan Uji Batas Mikroba

Cawan Petri	Gambar	Jumlah Koloni	Keterangan
		7	-
		9	-
		gagal	Daerah penyebaran terlalu besar
		8	-
		4	-
		7	-

Perhitungan :

Sesuai Interpretasi hasil, sampel yang digunakan adalah cawan petri  dengan jumlah mikroba 9 koloni, sehingga

 = 9 x  = 900 mikroba

VI.    Kesimpulan

Uji batas mikroba dapat menentukan apakah suatu produk memenuhi standar kandungan mikroba atau tidak.

Berdasarkan hasil pengamatan didapat kesimpulan bahwa the dengan merk frestea mengandung mikroba rata-rata sebanyak 900 atau 9 x . Dan masih memenuhi standar batas mikroba yang ditetapkan oleh BPOM, keterangan terlampir.

VII.  Daftar Pustaka

Departemen Kesehatan RI, 1995. Farmakope Indonesia, Edisi IV. Jakarta

Obat, Bio Farmasi, NAPZA, Kosalkes dan Obat Tradisional, BPOM Metode Analisis PPOMN 2001, Pusat Pengujian Obat dan Makanan Nasional Badan POM, Interpretasi Hasil Halaman 50

Ketentuan Standar Praktikum Mikrobiologi AKFAR Muhammadiyah Cirebon

Vibrio cholerae

BAB I

PENDAHULUAN

             Vibrio cholerae merupakan bakteri gram negatif, berbentuk basil (batang) dan bersifat motil (dapat bergerak), memiliki struktur antogenik dari antigen flagelar H dan antigen somatik O, gamma-proteobacteria, mesofilik dan kemoorganotrof, berhabitat alami di lingkungan akuatik dan umumnya berasosiasi dengan eukariot. Spesies Vibrio kerap dikaitkan dengan sifat patogenisitasnya pada manusia, terutama V. cholerae penyebab penyakit kolera di negara berkembang yang memiliki keterbatasan akan air bersih dan memiliki sanitasi yang buruk

Vibrio cholera adalah salah satu bakteri yang masuk dalam family Vibrionaceae selain dari Aeromonas dan Plesiomonas, dan merupakan bagian dari genus Vibrio. Bakteri ini pertama kali ditemukan oleh Robert Koch pada tahun 1884 dan sangat penting dalam dunia kedokteran karena menyebabkan penyakit kolera. Vibrio cholera banyak ditemui di permukaan air yang terkontaminasi dengan feces yang mengandung kuman tersebut, oleh karena itu penularan penyakit ini dapat melalui air, makanan dan sanitasi yang buruk.

BAB II

IDENTIFIKASI Vibrio cholerae

A.     Morfologi

Vibrio cholerae termasuk bakteri gram negative, berbentuk batang bengkok seperti koma dengan ukuran panjang 2-4 µm. Pada isolasi, Koch menamakannya “kommabacillus”. Tapi bila biakan diperpanjang, kuman itu basa menjadi batang lurus yang mirip dengan bakteri enteric gram negative.

Kuman ini dapat bergerak sangat aktif karena mempunyai satu buah flagella polar yang halus (monotrik). Kuman ini tidak membentuk spora. Pada kultur dijumpai koloni yang cembung, halus dan bulat yang keruh dan bergranul bila disinari.

B.    Fisiologi

Vibrio cholerae bersifat aerob atau anaerob fakultatif. Suhu optimum untuk pertumbuhan pada suhu 18-37°C. Dapat tumbuh pada berbagai jenis media, termasuk media tertentu yang mengandung garam mineral dan asparagin sebagai sumber karbon dan nitrogen. V. cholerae ini tumbuh baik pada agar Thiosulfate-citrate-bile-sucrose (TCBS), yang menghasilkan koloni berwarna kuning dan pada media TTGA (Telurite-taurocholate-gelatin-agar)

Salah satu cirri dari Vibrio cholerae ini adalah dapat tumbuh pada pH yang sangat tinggi (8,5-9,5) dan sangat cepat mati oleh asam. Pertumbuhan sangat baik pada pH 7,0. Karenanya pembiakan pada media yang mengandung karbohidrat yang dapat difermentasi, akan cepat mati. V. cholerae meragi sukrosa dan manosa tanpa menghasilkan gas tetapi tidak meragi albinosa. Kuman ini juga dapat meragi nitrit. Ciri khas lain yang membedakan dari bakteri enteric gram negative lain yang tumbuh pada agar darah adalah tes oksidasi hasilnya positif.

C.    Klasifikasi Ilmiah

Kongdom             : Bacteria

Filum                     : Proteobacteria

Kelas                    : Gamma Proteobacteria

Ordo                     : Vibrionales

Famili                   : Vibrionaceae

Genus                   : Vibrio

Spesies                : V. cholerae

Nama binomial    : Vibrio cholerae

D.    Struktur Antigen

Semua Vibrio cholerae mempunyai antigen flagel H yang sama. Antigen flagel H ini bersifat tahan panas. Antibodi terhadap antigen flagel H tidak bersifat protektif. Pada uji aglutinasi berbentuk awan. Antigen somatik O merupakan antigen yang penting dalam pembagian grup secara serologi pada Vibrio cholera. Antigen somatik O ini terdiri dari lipoposakarida. Pada reaksi aglutinasi berbentuk seperti pasir. Antibodi terhadap antigen O bersifat protektif.

E.     Patogenesis

Dalam keadaan alamiah, Vibrio cholerae hanya pathogen terhadap manusia. Seorang yang memiliki asam lambung yang normal memerlukan menelan sebanyak  atau lebih V. cholera dalam air agar menginfeksi, sebab kuman ini sangat sensitive pada suasana asam. Jika mediator makanan, sebanyak 102-104 organisme yang diperlukan karena kapasitas buffer yang cukup dari makanan. Beberapa pengobatandan keadaan yang dapat menurunkan kadar asam dalam lambung membuat seseorang sensitive terhadap infeksi Vibrio cholerae.

Ada dua jenis V. cholerae yang berpotensi sebagai patogen pada manusia. Jenis utama yang menyebabkan kolera adalah V. cholerae O1, sedangkan jenis-jenis lainnya dikenal sebagai non-O1.

V. cholerae O1 adaalah penyebab kolera Asiatik atau kolera epidemik. Kasus kolera sangat jarang terjadi di Eropa dan Amerika Utara. Sebagian besar kasus kolera terjadi di daerah-daerah (sub)-tropis. Kolera selalu disebabkan oleh air yang tercemar atau ikan (atau kerang) yang berasal dari perairan yang tercemar.

V. cholerae non-O1 hanya menginfeksi manusia dan hewan primata lainnya. Organisme ini berkerabat dengan V. cholerae O1, tetapi penyakit yang ditimbulkannya tidak separah kolera. Strain patogenik dan non-patogenik dari organisme ini merupakan penghuni normal di lingkungan air laut dan muara. Organisme ini pada masa lalu disebut sebagai non-cholera vibrio (NCV) dan nonagglutinable vibrio (NAG).

BAB III

KOLERA

A.     Gejala – Gejala Penyakit

Kolera merupakan nama penyakit yang disebabkan oleh V. cholerae .

Gejala-gejala kolera Asiatik dapat bervariasi dari diare cair yang ringan, sampai diare akut yang ditandai dengan kotoran yang berwujud seperti air cucian beras. Gejala awal penyakit ini umumnya terjadi dengan tiba-tiba, dengan masa inkubasi antara 6 jam sampai 5 hari. Kram perut, mual, muntah, dehidrasi, dan shock (turunnya laju aliran darah secara tiba-tiba). Kematian dapat terjadi apabila korban kehilangan cairan dan elektrolit dalam jumlah besar. Penyakit ini disebabkan karena korban mengkonsumsi bakteri hidup, yang kemudian melekat pada usus halus dan menghasilkan racun kolera. Produksi racun kolera oleh bakteri yang melekat ini menyebabkan diare berair yang merupakan gejala penyakit ini.

Pada penderita penyakit kolera ada beberapa hal tanda dan gejala yang ditampakkan, antara lain ialah :

Ø      Diare yang encer dan berlimpah tanpa didahului oleh rasa mulas atau tenesmus.

Ø      Feaces atau kotoran (tinja) yang semula berwarna dan berbau berubah menjadi cairan putih keruh (seperti air cucian beras) tanpa bau busuk ataupun amis, tetapi seperti manis yang menusuk.

Ø      Feaces (cairan) yang menyerupai air cucian beras ini bila diendapkan akan mengeluarkan gumpalan-gumpalan putih.

Ø      Diare terjadi berkali-kali dan dalam jumlah yang cukup banyak.

Ø      Terjadinya muntah setelah didahului dengan diare yang terjadi, penderita tidaklah merasakan mual sebelumnya.

Ø      Kejang otot perut bisa juga dirasakan dengan disertai nyeri yang hebat.

Ø      Banyaknya cairan yang keluar akan menyebabkan terjadinya dehidrasi dengan tanda-tandanya seperti ; detak jantung cepat, mulut kering, lemah fisik, mata cekung, hypotensi dan lain-lain yang bila tidak segera mendapatkan penangan pengganti cairan tubuh yang hilang dapat mengakibatkan kematian.

Dosis infektif – Penelitian menggunakan sukarelawan manusia yang sehat menunjukkan bahwa penyakit timbul apabila manusia mengkonsumsi kurang lebih satu juta organisme. Konsumsi antasida (obat yang menetralkan asam lambung) dapat menurunkan dosis infektif secara nyata.

Gejala-gejala V. cholerae non-O1 berupa diare dan kram perut. Demam yang disertai muntah dan mual terjadi pada 25% individu yang terinfeksi. Kira-kira 25% individu yang terinfeksi akan mengeluarkan kotoran dengan darah dan lendir. Diare, pada beberapa kasus, dapat menjadi sangat parah, dan berlangsung selama 6-7 hari. Diare biasanya terjadi dalam 48 jam setelah konsumsi organisme. Mekanisme organisme ini dalam menimbulkan penyakit tidak diketahui, namun demikian racun enterotoxin dan mekanisme penyerangan diduga menjadi penyebab penyakit ini. Penyakit muncul saat organisme melekatkan diri ke usus halus individu yang terinfeksi dan kemudian menyerang korbannya.

Dosis infektif – Diduga organisme dalam jumlah besar (lebih dari satu juta) harus dikonsumsi untuk dapat menyebabkan penyakit.

A.     

B.    Diagnosis

Penyakit kolera dapat dipastikan hanya dengan mengisolasi organisme penyebabnya dari kotoran diare individu yang terinfeksi.

Diagnosis terhadap infeksi V. cholerae non-O1 dilakukan dengan membiakkan organisme dari kotoran diare individu yang terinfeksi atau dari darah pasien yang menderita septicemia (infeksi dalam aliran darah).

C.    Penyebaran dan Penularan Penyakit Kolera

Kolera dapat menyebar sebagai penyakit yang endemik, epidemik, atau pandemik. Meskipun sudah banyak penelitian bersekala besar dilakukan, namun kondisi penyakit ini tetap menjadi suatu tantangan bagi dunia kedokteran modern. Bakteri Vibrio cholerae berkembang biak dan menyebar melalui feaces (kotoran) manusia, bila kotoran yang mengandung bakteri ini mengkontaminasi air sungai dan sebagainya maka orang lain yang terjadi kontak dengan air tersebut beresiko terkena penyakit kolera itu juga.

Misalnya cuci tangan yang tidak bersih lalu makan, mencuci sayuran atau makanan dengan air yang mengandung bakteri kolera, makan ikan yang hidup di air terkontaminasi bakteri kolera, Bahkan air tersebut (seperti disungai) dijadikan air minum oleh orang lain yang bermukim disekitarnya.

D.    Pengobatan

Prinsip dasar pengobatan kolera ini adalah mengganti air dengan elektrolit untuk mengurangi dehidrasi dan kekurangan garam dengan memasukan secara intravena cairan yang mengandung Natrium, Kalium, Chloride dan Bicarbonate.

Antibiotika yang sering digunakan untukm melawan kuman ini adalah Tetrasiklin. Tetrasiklin yang diberikan peroral dapat mengurangi keluarnya tinja yang mengandung kuman kolera dan memperpendek masa ekresi Vibrio cholerae.

Tetrasiklin juga memperpendek waktu timbulnya gejala klinis pada penderita kolera. Pada beberapa daerah epidemic, V. cholerae yang resisten dengan tetrasiklin telah muncul, dibawa oleh plasmid yang mudah berpindah. Tetrasiklin juga berguna pada penderita carrier sebab konsentrasinya pada empedu.

Tetrasiklin 500 mg tiga kali sehari selama 3 hari, atau doksisiklin 300 mg sebagai dosis tunggal, merupakan pilihan pengobatan. Perbaikan yang agresif pada kehilangan cairan menurunkan angka kematian ( biasanya < 1 %). Vaksin kolera oral memberikan efikasi lebih tinggi dibandingkan dengan vaksin parenteral.

Rehidrasi pada kolera sangat penting. Karena tubuh kehilangan banyak cairan, maka pasien harus diberi larutan ORS(-beras) sampai diare berhenti. Dengan rehidrasi layak angka kematian kini sudah menurun sampai 1%.

Pada kondisi tertentu, terutama diwilayah yang terserang wabah penyakit kolera pemberian makanan/cairan dilakukan dengan jalan memasukkan selang dari hidung ke lambung (sonde). Sebanyak 50% kasus kolera yang tergolang berat tidak dapat diatasi (meninggal dunia), sedangkan sejumlah 1% penderita kolera yang mendapat penanganan kurang adekuat meninggal dunia.

E.     Pencegahan

Kebersihan yang kurang, air yang tercemar, dan cara penanganan makanan yang kurang higienis merupakan penyebab utama infeksi. Karena itu pemanasan air dengan benar (hingga mendidih) dan sanitasi yang baik dapat mencegah infeksi V. cholerae.

Pencegahan juga dapat dilakukan dengan perbaikan sanitasi khususnya makanan dan air melalui pendidikan. Pasien kolera sebaiknya diisolasi, eksresinya didisinfeksi dan orang-orang kontak diawasi. Khemoprofilaksis dengan obat antimikroba mungkin diperlukan.

Bagi wisatawan yang memiliki daerah endemik kolera, sebaiknya memasak makanan sampai matang sebelum mengonsumsinya, kepiting harus dimasak lebih kurang 10 menit, memakan buah harus dikupas kulitnya dan dicuci, memakan es harus dihindari kecuali kita tau bahwa es terbuat dari air mendidih

Pemberian imunisasi dengan vaksin yang mengandung ekstrak lipopolisakarida dari vibrio atau suspense pekat vibrio dapat memberikan perlindungan yang terbatas pada orang-orang yang rentan (missal kontak antar anggota keluarga) tetapi tidak efektif sebagai alat kontrol epidemic. Vaksin ini memberikan proteksi 60 – 80% untuk masa 3 – 6 bulan. Di beberapa Negara meminta kepada pelancong yang datang dari daerah endemik untuk memberikan bukti bahwa mereka telah divaksinasi. Sertifikasi oleh WHO hanya berlaku selama 6 bulan.

Imunisasi toksoid kolera pada manusia tidak lebih baik daripada vaksin standar. Hingga saat ini perbaikan hygiene / sanitasi yang memberikan pencegahan yang mantap terhadap kolera.

BAB IV

KESIMPULAN

V cholerae adalah bakteri batang gram-negatif, berbentuk koma dan menyebabkan diare yang menimbulkan dehidrasi berat, kematian dapat terjadi setelah 3 – 4 jam pada pasien yang tidak dirawat. Toksin kolera dapat mempengaruhi transport cairan pada usus halus dengan meningkatkan cAMP, sekresi, dan menghambat absorpsi cairan. Penyebaran kolera dari makanan dan air yang terkontaminasi.

Gejala awal adalah distensi abdomen dan muntah, yang secara cepat menjadi diare berat, diare seperti air cucian beras. Pasien kekurangan elektrolit dan volume darah. Demam ringan dapat terjadi.

Kimia darah terjadi penurunan elektrolit dan cairan dan harus segera digantikan yang sesuai. Kalium dan bikarbonat hilang dalam jumlah yang signifikan, dan penggantian yang tepat harus diperhatikan. Biakan feses dapat ditemukan V.cholerae.

Target utama terapi adalah penggantian cairan dan elektrolit yang agresif. Kebanyakan kasus dapat diterapi dengan cairan oral. Kasus yang parah memerlukan cairan intravena.

Antibiotik dapat mengurangi volume dan masa berlangsungnya diare. Tetrasiklin 500 mg tiga kali sehari selama 3 hari, atau doksisiklin 300 mg sebagai dosis tunggal, merupakan pilihan pengobatan. Perbaikan yang agresif pada kehilangan cairan menurunkan angka kematian ( biasanya < 1 %). Vaksin kolera oral memberikan efikasi lebih tinggi dibandingkan dengan vaksin parenteral.

DAFTAR PUSTAKA

·        Tjay, Tan Hoan Drs. dan Drs. Kirana Rahardja. 2007. Obat-obat Penting. Jakarta: Gramedia

·        Pelczar, Michael dan E.C.S. Chan. 2006. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Jakarta: UI-Press

·        www.google.com

·        www.wikipedia.org